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技術(shù)文章

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香油中苯并芘殘留量的分析方法

更新時(shí)間:2020-12-16點(diǎn)擊次數(shù):2900

應(yīng)用簡介

本實(shí)驗(yàn)采用固相萃取結(jié)合高效液相色譜串聯(lián)熒光檢測(cè)器(SPE-HPLC) 的方法,建立了香油中苯并芘殘留量的檢測(cè)方法。香油經(jīng)正己烷溶解,Cleanert Silica和Cleanert BAP-3固相萃取柱凈化,Venusil ASB C18色譜柱(4.6 × 250 mm,5 μm,150 Å)分離,水和乙腈為流動(dòng)相進(jìn)行等度洗脫,外標(biāo)法進(jìn)行定量。結(jié)果表明,苯并芘添加量為0.1 mg/kg時(shí),回收率在80% ~ 100%之間,能夠滿足檢測(cè)要求。——應(yīng)用編號(hào):AF10098

苯并芘又稱苯并(α)芘,英文縮寫B(tài)aP,是一種常見的高活性間接致癌物和突變?cè)?。BaP存在于煤焦油、各類炭黑和煤、及焦化、煉油,瀝青、塑料等工業(yè)污水中。肉和魚中的BaP含量取決于烹調(diào)方法,水果、蔬菜和糧食中的BaP含量取決其來源。主要來自洗刷大氣的雨水水中的BaP以吸附于某些顆粒上、溶解于水中和呈膠體狀態(tài)等三種形式存在,其中大部分吸附在顆粒物質(zhì)上。BaP被認(rèn)為是高活性致癌劑,但并非直接致癌物,必須經(jīng)細(xì)胞微粒體中的混合功能氧化酶激活才具有致癌性。BaP不僅廣泛存在于環(huán)境中,而且與其它多環(huán)芳烴的含量不一定的相關(guān)性,長期生活在含BaP的空氣環(huán)境中會(huì)造成慢性中毒。許多國家的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證明,BaP具有致癌、致畸、致突變性。危險(xiǎn)特性,遇明火、高熱可燃。受高熱分解放出有毒的氣體因此通過有效的實(shí)驗(yàn)技術(shù)手段,對(duì)香油中的有關(guān)苯并芘殘留進(jìn)行監(jiān)控,以確保消費(fèi)者對(duì)食品消費(fèi)的安全具有重要意義。

本實(shí)驗(yàn)通過優(yōu)化前處理方法建立了苯并芘在香油中的高效液相色譜方法。

 

實(shí)驗(yàn)部分

儀器、試劑與材料

主要儀器設(shè)備

高效液相色譜儀(配熒光檢測(cè)器)

試劑材料

正己烷、二氯甲烷、乙腈均為色譜純;實(shí)驗(yàn)用水為超純水;苯并芘標(biāo)準(zhǔn)品(純度99%);一次性無菌注射器;針式過濾器PTFE(0.22 μm,直徑13 mm);

Cleanert Silica固相萃取柱柱:500 mg/6 mL(貨號(hào):SI5006);Cleanert BAP-3固相萃取柱柱:500 mg/6 mL (貨號(hào):Bap5006)

 

樣品制備

樣品處理

稱取香油0.5 g,置于12 mL樣品瓶中,加入3 mL正己烷,渦旋震蕩溶解,作為待凈化液。

樣品凈化

取Cleanert BAP-3萃取柱(500 mg/6 mL),需在柱上串聯(lián)一只Cleanert Silica固相萃取柱,依次用5 mL二氯甲烷,5 mL正己烷活化小柱;將上述待凈化液上樣到小柱上,然后用2 mL正己烷潤洗樣品瓶,將潤洗液也上樣到柱上,先用5 mL正己烷淋洗串聯(lián)柱,待溶液*滴至Cleanert BAP-3上,將Silica硅膠柱棄去,再用5 mL正己烷淋洗Cleanert BAP-3柱,棄去淋洗液;后用5 mL二氯甲烷洗脫,收集;40℃氮?dú)獯蹈上疵撘?,? mL乙腈溶解定容,超聲10 s,過0.22 μm PTFE濾膜后進(jìn)HPLC檢測(cè)。

實(shí)驗(yàn)條件:液相條件

色譜柱:Venusil ASB C18,5 μm,150 Å,4.6 × 250 mm

流動(dòng)相:水︰乙腈= 12︰88

柱  溫:30℃

進(jìn)樣量:20 μL

流  速:1.0 mL/min

發(fā)射波長:406 nm;激發(fā)波長:384 nm

 

結(jié)果與討論

由表1可知,采用固相萃取結(jié)合高效液相色譜法檢測(cè)苯并芘的加標(biāo)回收率在80% ~100%之間,CV值小于10%,能夠滿足檢測(cè)要求。由圖可看出經(jīng)Cleanert Silica串聯(lián)Cleanert BAP-3柱凈化,采用Venusil ASB C18色譜柱檢測(cè)得到的苯并芘峰形良好,且保留時(shí)間穩(wěn)定。

 

實(shí)驗(yàn)結(jié)果

表1. 香油中苯并芘實(shí)驗(yàn)結(jié)果

物質(zhì)名稱

加標(biāo)量/(mg/kg)

平均回收率/%

CV/%

RT/min

苯并芘

0.1

90.2

2.2

8.41

 

 

結(jié)論

本實(shí)驗(yàn)建立了香油中苯并芘殘留量的前處理方法,并結(jié)合高效液相色譜對(duì)香油中苯并芘的殘留量進(jìn)行了測(cè)定。對(duì)于加標(biāo)量為0.1 mg/kg的樣品進(jìn)行了檢測(cè),回收率在80% ~ 100%之間,符合要求。

 

附:相關(guān)產(chǎn)品

產(chǎn)品名稱

規(guī)格描述

包裝數(shù)量

訂貨號(hào)

Venusil ASB C18

5µm,150Å,4.6×250mm

1支

VS952505-0

Cleanert BAP-3

500mg/6mL

30支/pk

Bap5006

Cleanert Silica

500mg/6mL

30支/包

SI5006

保護(hù)柱套

適用于4.6*10mm和2.1*10mm

1支

SH-100

直聯(lián)式保護(hù)柱芯

5µm,150Å;4.6*10mm

4支/包

VS950105-0S

1.5 mL樣品瓶

短螺紋透明帶書寫處 32*11.6mm

100/pk

1109-0519

1.5 mL樣品瓶蓋

9mm中心孔藍(lán)蓋,紅色橡膠/米色PTFE隔墊 45°Shore A; 1.0mm

100/pk

0915-1819

針式過濾器PTFE

單膜,13mm,0.22µm

100個(gè)/包

AS041320-T

一次性注射器

2 mL無針頭

100支/包

LZSQ-2ML

正己烷

4 L/瓶,色譜純

4×4 L/箱

AH216-4

二氯甲烷

4 L/瓶,色譜純

4×4 L/箱

AH300-4

乙腈

4 L/瓶,色譜純

4×4 L/箱

AH015-4

SPE-M08正壓型多功能固相萃取裝置

8 通道

1 臺(tái)

SPE-M08

15位氮吹儀

15位

1 臺(tái)

NV15-M

 

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